ハイブリドーマ細胞を融合するには何を使用しますか?

ハイブリドーマ細胞を融合するには何を使用しますか?

ハイブリドーマ技術は、モノクローナル抗体を調製するための中核的な方法の 1 つです。鍵となるのは、免疫B細胞と骨髄腫細胞を融合させてハイブリドーマ細胞を形成することです。この記事では、融合方法、主要な試薬、ハイブリドーマ細胞の操作手順に関する構造化された分析を実施し、関連するデータの比較を添付します。

1. ハイブリドーマ細胞融合のコアメソッド

2. 一般的に使用される試薬の性能比較

3. 運用プロセスの主なステップ

1.細胞の前処理: 免疫脾臓細胞と骨髄腫細胞を5:1の比率で混合し、遠心分離して血清タンパク質を除去します。

2.融合反応: 勾配遠心法を使用してPEG溶液を徐々に添加し、37℃のウォーターバスで反応時間を正確に制御します。

3.選択的な文化: HAT 培地 (ヒポキサンチン-アミノプテリン-チミジンを含む) を使用してハイブリドーマ細胞をスクリーニングします。

4.クローン文化: 限界希釈法によりモノクローナル細胞株を取得し、ELISA により抗体分泌を検出します。

4. 技術的な最適化の方向性

5. 業界の最新トレンド (過去 10 日間のホットスポット)

1. 「Nature Protocols」の最新レポートでは、マイクロ流体チップ融合技術を使用すると、ハイブリドーマ形成効率が 90% を超える可能性があることが示されています。

2. 上海のバイオ企業が新型電気融合装置を発表。特許取得済みの波形設計により、細胞死率が 5% 未満に制御されます。

3. CRISPR 遺伝子編集技術は骨髄腫細胞株の形質転換に適用され始めており、抗体分泌の安定性が大幅に向上しています。

要約すると、ハイブリドーマ細胞融合技術は、高効率化と標準化を目指して開発されています。研究者は、実験のニーズと装置の条件に基づいて、従来のPEG法と新しい電気融合技術の間で合理的な選択をする必要があります。